重組率

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重組率

1、遺傳學(xué)重組率

交換值(重組率):指同源染色體的非姊妹染色單體間有關(guān)基因染色體片段發(fā)生交換的頻率,一般利用重新組合配子數(shù)占總配子數(shù)的百分率進(jìn)行估算。

交換值(%)=(重新組合配子數(shù)/總配子數(shù))×100

交換值的幅度經(jīng)常變化于0-50%之間:

影響交換值的因子:

1).性別:雄果蠅、雌蠶中未發(fā)現(xiàn)染色體片段發(fā)生交換;

2).溫度:家蠶第二對(duì)染色體上PS-Y(PS黑斑、Y幼蟲黃血)

飼養(yǎng)溫度(℃) 30 28 26 23 19

交換值(%) 21.48 22.34 23.55 24.98 25.86

3).基因位于染色體上的部位:離著絲點(diǎn)越近,其交換值越小,著絲點(diǎn)不發(fā)生交換。

4).其它:年齡、染色體畸變等也會(huì)影響交換值。

2、基因工程學(xué)重組率

重組率:連接反應(yīng)結(jié)束后,含有外源DNA片段的重組分子數(shù)與加入的載體分子數(shù)之比。較為理想的重組率為25-75%

提高重組率的方法:

連接反應(yīng)條件 外源片段:載體=2:1-10:1(分子數(shù)),增加碰撞機(jī)會(huì),減少自身環(huán)化。

載體除磷 (磷酸酯酶5’除磷)。

TdT在3’端增加人工粘性末端,防止載體自我環(huán)化 。

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