重組率
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重組率:
1、遺傳學(xué)重組率
交換值(重組率):指同源染色體的非姊妹染色單體間有關(guān)基因的染色體片段發(fā)生交換的頻率,一般利用重新組合配子數(shù)占總配子數(shù)的百分率進(jìn)行估算。
交換值(%)=(重新組合配子數(shù)/總配子數(shù))×100
交換值的幅度經(jīng)常變化于0-50%之間:
- 當(dāng)交換值——>0%,連鎖強(qiáng)度越大,兩個(gè)連鎖的非等位基因之間交換越少;
- 交換值——>50%,連鎖強(qiáng)度越小,兩個(gè)連鎖的非等位基因之間交換越大。所以,交換值的大小主要與基因間的距離遠(yuǎn)近有關(guān)。
影響交換值的因子:
1).性別:雄果蠅、雌蠶中未發(fā)現(xiàn)染色體片段發(fā)生交換;
2).溫度:家蠶第二對(duì)染色體上PS-Y(PS黑斑、Y幼蟲黃血)
飼養(yǎng)溫度(℃) 30 28 26 23 19
交換值(%) 21.48 22.34 23.55 24.98 25.86
3).基因位于染色體上的部位:離著絲點(diǎn)越近,其交換值越小,著絲點(diǎn)不發(fā)生交換。
4).其它:年齡、染色體畸變等也會(huì)影響交換值。
- 由于交換值具有相對(duì)穩(wěn)定性,常以該數(shù)值表示兩個(gè)基因在同一染色體上的相對(duì)距離——遺傳距離。
2、基因工程學(xué)重組率
重組率:連接反應(yīng)結(jié)束后,含有外源DNA片段的重組分子數(shù)與加入的載體分子數(shù)之比。較為理想的重組率為25-75%
提高重組率的方法:
連接反應(yīng)條件 外源片段:載體=2:1-10:1(分子數(shù)),增加碰撞機(jī)會(huì),減少自身環(huán)化。
載體除磷 (磷酸酯酶5’除磷)。
TdT在3’端增加人工粘性末端,防止載體自我環(huán)化 。
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