生物化學與分子生物學/動物病毒載體

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生物化學與分子生物學

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質(zhì)粒噬菌體載體只能在細菌中繁殖,不能滿足真核DNA重組需要。感染動物的病毒可改造用作動物細胞的載體。由于動物細胞的培養(yǎng)和操作較復雜、花費也較多,因而病毒載體構(gòu)建時一般都把細菌質(zhì)粒復制起始序列放置其中。使載體及其攜帶的外來序列能方便地在細菌中繁殖和克隆,然后再引入真核細胞。目前病毒載體常用者有改造來自猴腎病毒SV40(Simian Virus 40)、逆轉(zhuǎn)錄病毒和昆蟲桿狀病毒等,使用這些病毒載體的目的多為將目的基因或序列放入動物細胞中表達或試驗其功能、或作基因治療等(見后)。

基因組十分龐大,約含4×109bp,建立和篩選人的基因組文庫,要求有容量更大的載體,酵母人工染色體(yeast artificial chromosome,YAC)載體應運而生。YAC含有酵母染色體端粒(telesome)、著絲點(centromere)及復制起點等功能序列,可插入長度達200-500kb的外源DNA,導入酵母細胞可以隨細胞分裂周期復制繁殖供作克隆,成為人基因組研究計劃的重要

32 噬菌體載體 | 目的序列與載體的連接 32
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