高效液相層析

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◆高效液相層析（又名高壓液相色譜）

70年代新發(fā)展的層析法。其特點(diǎn)是：用高壓輸液泵，壓強(qiáng)最高可達(dá)5000psi（相當(dāng)于34個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓）。用直徑約3～10微米的超細(xì)支持物裝填均勻的不銹鋼柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一層1～2微米的二氧化硅，經(jīng)硫酰氯反應(yīng)生成Si—Cl，進(jìn)一步連接疏水的烷基，如Si—C18H37，或陽離子交換基團(tuán)—Si（CH2）n—C6H4SO3H，或陰離子交換基團(tuán)—Si（CH2）nNH2。這種支持物能承受很高的壓力，化學(xué)性能穩(wěn)定。用不同類型支持物的HPLC，可做吸附層析、離子交換層析和凝膠過濾層析。其分析微量化可達(dá)10-10克水平。但用于制備，可以純化上克的樣品。展層時間短，一般需幾分鐘到10余分鐘。其分析速度、精確度可與氣相層析媲美。HPLC適于分析分離不揮發(fā)和極性物質(zhì)。而氣相層析只適用于揮發(fā)性物質(zhì)，兩者互為補(bǔ)充，都是目前最為理想的層析法。HPLC配有程序控制洗脫溶劑的梯度混合儀，數(shù)據(jù)處理的積分儀和記錄儀等電子系統(tǒng)，成為一種先進(jìn)的分析儀器，在生物化學(xué)、化學(xué)、醫(yī)藥學(xué)和環(huán)境科學(xué)的研究中發(fā)揮了重要作用。

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