連續(xù)稀釋
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連續(xù)稀釋 (serial dilution)逐步在溶液中稀釋樣品,在每次稀釋中樣品及溶劑的比例相同,可產(chǎn)生呈幾何級(jí)數(shù)的稀釋濃度。連續(xù)10倍稀釋稱為對(duì)數(shù)稀釋?zhuān)B續(xù)100.5倍稀釋則稱為半對(duì)數(shù)稀釋。此方法常用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)。
在實(shí)驗(yàn)中常需要將樣品做大量稀釋?zhuān)缦♂屢蝗f(wàn)倍。使用傳統(tǒng)稀釋方法,1毫升的樣品需要用9999毫升的溶劑溶解。而連續(xù)稀釋可以節(jié)省溶劑的消耗,且較為精確快速。
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在微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用
連續(xù)稀釋除了應(yīng)用于化學(xué)藥品的稀釋上,同樣可用于降低樣品中微生物或細(xì)胞的濃度。例如:在固定時(shí)間內(nèi),瓊脂培養(yǎng)基上的菌落數(shù)量、大小與菌液濃度相關(guān),且由于部分檢測(cè)技術(shù)如細(xì)胞記數(shù)盤(pán),是計(jì)算網(wǎng)格內(nèi)的微生物、細(xì)胞的個(gè)數(shù),或是在固定體積下的微生物、細(xì)胞的個(gè)數(shù)(絕對(duì)濃度)。連續(xù)稀釋可以有效的降低待測(cè)液中的細(xì)胞個(gè)數(shù),更容易估算樣品的絕對(duì)濃度。
實(shí)驗(yàn)方法
以100倍稀釋、樣品濃度1M、體積1毫升的樣品為例。
將溶劑與樣品比保持在9:1,即9毫升溶劑和1毫升樣品混合后,樣品濃度變?yōu)樵瓨悠返?/10(10倍稀釋)。再取1毫升10倍稀釋后的樣品與9毫升溶劑混合,得到濃度為原樣品1/100(100倍稀釋)的稀釋樣品。
參考文獻(xiàn)
- Michael L. Bishop, Edward P. Fody, Larry E. Schoeff. Clinical Chemistry: Principles, Procedures, Correlations. Lippincott Williams & Wilkins, 2004, p. 24. ISBN 0-7817-4611-6.
參考來(lái)源
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