電融合
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當(dāng)細(xì)胞置于非常高的電場中,細(xì)胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞內(nèi),這一現(xiàn)象稱為電融合。又叫電穿孔,當(dāng)細(xì)胞置于非常高的電場中,細(xì)胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞內(nèi),這一現(xiàn)象稱為電穿孔。運(yùn)用這一技術(shù),許多物質(zhì),包括DNA、RNA、蛋白質(zhì)、藥物、抗體和熒光探針都能載入細(xì)胞。作為一種基因轉(zhuǎn)導(dǎo)方法,電穿孔已被廣泛用于各種細(xì)胞類型,包括細(xì)菌、酵母、植物和動物細(xì)胞;而且,它還能作為注射方法(稱為電注射),把各種外源物質(zhì)引入活細(xì)胞。與其他常用的導(dǎo)入外源物質(zhì)的方法相比,電穿孔具有很多優(yōu)點(diǎn)。首先,不必象顯微注射那樣使用玻璃針,不需要技術(shù)培訓(xùn)和昂貴的設(shè)備,可以一次對成百萬的細(xì)胞進(jìn)行注射。第二,與用化學(xué)物質(zhì)相比,電穿孔幾乎沒有生物或化學(xué)副作用。第三,因?yàn)殡姶┛资且环N物理方法,較少依賴細(xì)胞類型,因而應(yīng)用廣泛。實(shí)際上,對大多數(shù)細(xì)胞類型,用電穿孔法基因的轉(zhuǎn)移效率比化學(xué)方法高得多。
除了能使細(xì)胞膜具有通透性,讓外界的分子擴(kuò)散入胞液中以外,高強(qiáng)度的電場脈沖也能引起細(xì)胞融合,這一現(xiàn)象叫做電融合。然而,在用電脈沖融合前必須使細(xì)胞相互緊密接觸,這一電融合方法在原生質(zhì)融合制取雜交植物,胚胎細(xì)胞相互融合制備動物克隆方面非常有用,尤其在制取雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體方面用處很大。幾個實(shí)驗(yàn)室已證明使用電場電融合效率比常規(guī)的化學(xué)融合方法高10到100倍,最近,貼壁細(xì)胞的電融合還被用來研究細(xì)胞融合時細(xì)胞的骨架成分和細(xì)胞器的動力學(xué)重排。
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