愈傷組織
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在無菌條件下,將植物器官或組織(如芽、莖尖、根尖或花藥)的一部分切下來,放在適當?shù)娜斯?a href="/w/%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA" title="培養(yǎng)基">培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),這些器官或組織就會進行細胞分裂,形成新的組織。不過這種組織沒有發(fā)生分化,只是一團薄壁細胞,叫做愈傷組織。在適合的光照、溫度和一定的營養(yǎng)物質(zhì)與激素等條件下,愈傷組織便開始分化,產(chǎn)生出植物的各種器官和組織,進而發(fā)育成一棵完整的植株。
愈傷組織(callus)原指植物體的局部受到創(chuàng)傷刺激后,在傷口表面新生的組織。它由活的薄壁細胞組成,可起源于植物體任何器官內(nèi)各種組織的活細胞。在植物體的創(chuàng)傷部分,愈傷組織可幫助傷口愈合;在嫁接中,可促使砧木與接穗愈合,并由新生的維管組織使砧木和接穗溝通;在扦插中,從傷口愈傷組織可分化出不定根或不定芽,迸而形成完整植株。在植物器官、組織、細胞離體培養(yǎng)時,條件適宜也可以長出愈傷組織。其發(fā)生過程是:外植體中的活細胞經(jīng)誘導,恢復其潛在的全能性,轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚毎?,繼而其衍生的細胞分化為薄壁組織而形成愈傷組織。從植物器官、組織、細胞離體培養(yǎng)所產(chǎn)生的愈傷組織,在一定條件下可進一步誘導器官再生或胚狀體而形成植株。在單倍體育種中,也可由花粉產(chǎn)生的愈傷組織或胚狀體分化成單倍體植株。甚至可由原生質(zhì)體培養(yǎng)誘導植株或器官再生。故愈傷組織的概念已不局限于植物體創(chuàng)傷部分的新生組織了。
在植物的組織培養(yǎng)中,從一塊外植體形成典型的愈傷組織,大致要經(jīng)歷三個時期:啟動期、分裂期和形成期。啟動期指細胞準備進行分裂的時期。外源植物生長激素對誘導細胞開始分裂效果很好。常用的有萘乙酸、吲哚乙酸、細胞分裂素等。通常使用細胞分裂素和生長素比例在1:l來誘導植物材料愈傷組織的形成。分裂期是指外植體細胞經(jīng)過誘導以后脫分化,不斷分裂、增生子細胞的過程。分裂期愈傷組織的特點是:細胞分裂快,結(jié)構(gòu)疏松,顏色淺而透明。分化期是指在分裂的末期,細胞內(nèi)開始出現(xiàn)一系列形態(tài)和生理上的變化,從而使愈傷組織內(nèi)產(chǎn)生不同形態(tài)和功能的細胞。這些細胞類型有薄壁細胞、分生細胞、色素細胞、纖維細胞等等。外植體的細胞經(jīng)過啟動、分裂和分化等一系列變化,形成了無序結(jié)構(gòu)的愈傷組織。如果在原來的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)愈傷組織,會由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)不足或有毒代謝物的積累,導致愈傷組織停止生長,甚至老化變黑、死亡。如果要讓愈傷組織繼續(xù)生長增殖,必須定期地(2~4個星期)將它們分成小塊“接種到新鮮的培養(yǎng)基上,這樣愈傷組織就可以長期保持旺盛的生長。
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愈傷組織(callus, culli) 植物受創(chuàng)傷后,在傷面新生的組織稱為愈傷組織。其原因是由于受創(chuàng)傷的刺激后,傷面附近的生活組織恢復了分裂機能,加速增生而將傷面愈合。在植物組織培養(yǎng)中的愈傷組織是指植物細胞在組織培養(yǎng)過程中形成的無一定結(jié)構(gòu)的組織團塊,在適宜的條件下,愈傷組織可再分化,形成芽、根,再生成植株。
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