基因診斷與性病/PCR標(biāo)本的制備

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基因診斷與性傳播疾病

基因診斷與性傳播疾病
- 基因擴(kuò)增技術(shù)（PCR）
  - PCR的基本原理和基本程序
  - PCR的特點(diǎn)
  - PCR方法
  - PCR反應(yīng)的基本條件及其對(duì)PCR的影響
  - PCR標(biāo)本的制備
  - PCR實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題對(duì)策
  - PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析法

在將Taq DNA 聚合酶引入PCR反應(yīng)，并使之達(dá)到自動(dòng)化之后，PCR反應(yīng)已變得十分的簡(jiǎn)單了。但是PCR樣品的采集及制備卻并非同樣簡(jiǎn)單，而且，許多PCR的失敗都?xì)w因于標(biāo)本的制備不當(dāng)。用于PCR的標(biāo)本必須經(jīng)適當(dāng)處理后才能使用，因?yàn)闃?biāo)本中的許多雜質(zhì)能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外，處理標(biāo)本可使待擴(kuò)增DNA暴露，能與引物復(fù)性。關(guān)于PCR標(biāo)本制備各種專業(yè)書(shū)中介紹了許多，我們實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)操作復(fù)雜、不慎便容易造成污染，且不實(shí)用。現(xiàn)介紹一種簡(jiǎn)單快速的處理方法即3%異硫氰酸胍和待檢標(biāo)本混合100℃，10min，離心取上清作為PCR模板即可。