醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)/等位基因的特異寡核苷酸探針診斷法

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醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)基礎(chǔ)

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基因突變部位和性質(zhì)已完全明了時,可以合成等基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素標記進行診斷。探針通常為長20bp左右的核苷酸。用于探測點突變時一般需要合成兩種探針,一種與正?;蛐蛄型耆恢?,能與之穩(wěn)定地雜交,但不能與突變基因序列雜交;另一種與突變基因序列一致,能與突變基因序列穩(wěn)定雜交,但不能與正常基因序列穩(wěn)定雜交,這樣,就可以把只有一個堿基發(fā)生了突變的基因區(qū)別開來.

PCR可結(jié)合ASO,即PCR-ASO技術(shù),即先將含有突變點的基因有關(guān)片段進行體外擴增,然后再與ASO探針作點雜交,這樣大大簡化了方法,節(jié)約了時間,而且只要極少量的基因組DNA就可進行。

32 擴增片段長度多態(tài)性 | 單鏈構(gòu)象多態(tài)性診斷法 32
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