冰凍蝕刻

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冰凍蝕刻(freeze-etching)技術(shù)是在冰凍斷裂技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的更復(fù)雜的復(fù)型技術(shù)。如果將冰凍斷裂的樣品的溫度稍微升高，讓樣品中的冰在真空中升華，而在表面上浮雕出細(xì)胞膜的超微結(jié)構(gòu)。當(dāng)大量的冰升華之后，對浮雕表面進(jìn)行鉑-碳復(fù)型，并在腐蝕性溶液中除去生物材料， 復(fù)型經(jīng)重蒸水多次清洗后，置于載網(wǎng)上作電鏡觀察?！　?/p>

冰凍蝕刻原理

冰凍蝕刻（freeze-etching）亦稱冰凍斷裂（freeze-fracture）。標(biāo)本置于-100?C的干冰或-196?C的液氮中，進(jìn)行冰凍。然后用冷刀驟然將標(biāo)本斷開，升溫后，冰在真空條件下迅即升華，暴露出斷面結(jié)構(gòu)，稱為蝕刻（etching）。蝕刻后，向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑，再以90度角噴涂一層碳，加強(qiáng)反差和強(qiáng)度。然后用次氯酸鈉溶液消化樣品，把碳和鉑的膜剝下來，此膜即為復(fù)膜（replica）。復(fù)膜顯示出了標(biāo)本蝕刻面的形態(tài)，在電鏡下得到的影像即代表標(biāo)本中細(xì)胞斷裂面處的結(jié)構(gòu)。

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